CHO细胞株设计新思路，倍谙基在权威期刊发表CHO细胞多标记筛选研究

时间：2026年03月20日

近日，倍谙基联合华东理工大学在生物工程领域国际权威期刊《Biotechnology and Bioengineering》发表研究“The Innovative Multi‐Marker Selection System Based on Tyrosine Synthesis Pathway for Monoclonal Antibody Expression in CHO Cells”，成功构建基于酪氨酸合成通路的CHO细胞多标记筛选系统。该刊是生物工程学科历史最悠久、最具影响力的顶级专业期刊之一，在业内享有极高的学术声誉。

传统单基因筛选的局限

CHO细胞是治疗性蛋白生产最主流的表达平台，稳定、高产CHO细胞株是生产的基石，其中筛选系统在其中起关键作用。目前主流的GS系统和DHFR系统均基于单基因筛选，存在富集效率有限（筛选阈值易饱和）、多基因共表达不协调等问题。虽有研究尝试构建多重营养缺陷型CHO细胞株以增加标记基因数量，但往往导致代谢负担增加，影响细胞生长和产量。

基于酪氨酸通路的协同筛选设计

本研究从酪氨酸合成通路的代谢逻辑出发，通过敲除CHO细胞中该通路的三个关键基因——PCBD1、PAH、QDPR，构建了酪氨酸营养缺陷型细胞CHO-Tyr-ko。在酪氨酸剥夺环境中，该细胞株的存活严格依赖这三个基因的协同表达，由此建立了以CHO-Tyr-ko细胞为宿主、以三基因为标记的非抗性筛选系统。

抗体表达验证

为验证该系统的抗体表达能力，团队利用三标记特性调控轻重链基因组合，并在不同培养工艺和营养策略下进行系统测试。结果显示，H/L/L基因组合最佳，其产物表达显著优于GS系统（Ctrl组）。

流加工艺中，在仅基础培养基含酪氨酸的条件下，抗体产量达0.35 g/L；在无酪氨酸的条件中，产物比生成速率达3.24 pg/cell/day，显著高于GS系统的0.90 pg/cell/day。灌流工艺中，在无酪氨酸培养基中，H/L/L组抗体产量达1.60 g/L，而GS系统为0.63 g/L。

研究意义

本研究的核心创新在于将传统单基因筛选升级为多基因协同筛选，不仅解决了单一筛选阈值易饱和的问题，还通过代谢压力实现了抗体轻重链的协调表达。这一三标记筛选系统的设计也为双抗、融合蛋白等复杂分子的细胞株构建提供了更多组合可能，具有广泛的应用前景。
（更多内容，请查阅原文：https://doi.org/10.1002/bit.70185）

本研究中使用的CHO细胞培养基均由倍谙基自主开发，依托研发团队在细胞培养领域四十年的知识积累与技术沉淀，倍谙基已建立完整的CHO细胞无血清培养基全解决方案，覆盖从研发、临床到商业化生产的各阶段：

·Eden系列CHO细胞CD培养基产品——产量相较于进口品牌成倍提升，已成功应用在60多个项目中

·EasZN系列CD培养基——专为CHOZN等细胞因子依赖的CHO细胞设计，蛋白产量相较于进口平均提升30%以上

·UltraFeed系列流加培养基——可搭配不同基础培养基，相较于其他流加培养基产量平均提升25%

·Tuner系列质量调节剂——以最简化的方式，精准调控抗体糖型

·RapidTrans CHO表达试剂盒V2——产量超越进口竞品的同时，价格大幅降低

·RapidExpan CHO克隆培养基——细胞株构建效率提升20%以上