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如何攻克CHO细胞单克隆筛选瓶颈？四大策略实现加速进阶

时间：2026年01月07日

CHO细胞蛋白表达能力强，易进行高密度悬浮培养，并具备哺乳动物细胞典型的翻译后修饰功能，已成为生物药生产的核心平台。全球约70%的生物药物是通过CHO细胞生产的。每一款抗体药物的诞生，都始于一个单一的、高质量的CHO细胞株。

CHO细胞株构建的关键瓶颈：单克隆高效筛选

CHO细胞株的构建是一个系统而复杂的过程，主要包括基因转染、细胞筛选、克隆扩增和稳定性评估等步骤。单克隆阶段是CHO细胞株构建过程中的关键环节，它确保了每个细胞株均源自单一祖先，避免了遗传异质性的干扰，从而保证了药物表达水平的一致性和产物质量的稳定性。这一环节的严格把控，是生物药安全性和有效性的重要保障。然而，这一关键环节却常常因单克隆形成率低、生长缓慢，成为整个开发流程中最耗时、变数最大的步骤。

突破瓶颈：CHO细胞单克隆筛选四大优化策略

如何突破这一关键瓶颈？以下四大核心策略为您指明方向：

01.转染优化：奠定高产克隆基础

使用高效的转染试剂和适宜的转染参数，提高基因导入效率，从源头提升有效整合细胞的数目，为获得更多单克隆提供可能。

02.精准分选：确保克隆纯度高

如采用荧光激活细胞分选（FACS）或磁珠分选等技术，高效分离目标细胞，极大提高单克隆群体的纯度，减少后续筛选工作量。

03.系统赋能：实现高通量自动化筛选

借助如ClonePix FL等自动化克隆筛选系统，实现快速、无损的高通量筛选，大幅提升筛选通量与客观性。

04.培养基与培养体系优化：提供关键生长支持

优化培养基成分与培养环境（如添加特定生长因子、精确控制pH/溶氧），为克隆细胞的生长增殖提供最直接的动力，这是提升形成率与生长速度的基石。

掌握上述策略，可系统性提升单克隆筛选效率。若您正在寻找可靠、高效的培养基解决方案，倍谙基RapidExpan CHO克隆培养基可帮助您：

RapidExpan CHO 克隆培养基

支持多种CHO细胞株单克隆生长

采用有限稀释法（0.5 cells/ 孔）铺板，结果显示在CHO-K1、ExpiCHO-S和CHOZN等细胞株中，平均单克隆形成率达到34%~40%。表明RapidExpan CHO克隆培养基能够高效支持不同CHO细胞株的单细胞生长与克隆形成。

显著提升克隆形成率

以RapidExpan CHO克隆培养基的克隆形成率为基准（归一化处理）进行比较。使用ATCC CHO-K1细胞株铺板，在Day11，RapidExpan CHO克隆培养基的克隆形成率显著高于其他品牌培养基。

单克隆形成案例：RapidExpan CHO培养基显著提升单克隆筛选效率

在单克隆筛选阶段，使用其他品牌培养基均不支持CHO细胞生长和克隆形成。更换至 RapidExpan CHO 克隆培养基后，显著改善细胞生长状态，并提高克隆形成率。下图展示Day 0~Day 8的克隆生长情况。

Minipool筛选和表达案例：筛选效率、项目周期和克隆产量均优于其他品牌

在宠物治疗性蛋白稳转细胞株构建项目中，电转48h后，以2000 cells/孔进行minipool铺板并同步施加 puromycin 加压筛选。RapidExpan CHO克隆培养基仅需15 天即可完成克隆形成，较 Brand A所需的21天缩短了6天；且具有更高的筛选效率，5 板共检测到468个阳性克隆，较Brand A提升33.7%。

* 能够检测到蛋白产量的孔

通过Gator进行的产量分析，RapidExpan CHO克隆培养基（day 15）的上清产量显著优于Brand A培养基（day 21）。同时，两组各筛选出的前17个高表达克隆，使用Eden B101 Ultra套组流加培养评价表达量，所有克隆产量均优于Brand A 。以上数据表明RapidExpan CHO克隆培养基在筛选效率、项目周期和克隆产量三个关键维度均具有显著优势。

细胞株开发用培养基产品：

Reference

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